導致基因探針法PCR試劑盒變質的原因及使用注意事項
點擊次數(shù)：965 更新時間：2021-01-20
基因探針法PCR試劑盒變質了就沒辦法使用了，因為它會影響實驗結論。那具體是哪些原因會導致它變質呢？下面請聽聽的講述。
1、試劑因素
不同批次的產品在制作過程中很難保證質量*一致，即使是通過批檢的項目其檢測結果也存在差異，因此必須選擇和訂購長批號的試劑，并保證保存條件。嚴格執(zhí)行這一標準可以避免因試劑批號改變而重新建立質控體系及重新評估試劑的復雜過程，并且能夠保證結果的穩(wěn)定性；對于效期短、使用率低的試劑，應當小量分裝，每次使用則取分裝部分即可，避免反復凍融造成試劑的失效。
2、樣本因素
標本干擾因素包括內源性干擾因素和外源性干擾因素，前者包括類風濕因子、補體、異嗜性抗體、自身抗體、溶菌酶等，后者包括標本溶血、標本被污染、標本貯存時間過長、標本凝固不全、冷凍標本的反復凍融等。
3、操作因素
操作步驟復雜，操作不當將引起較大的誤差。加樣、溫育、洗滌、顯色、比色。
在使用基因探針法PCR試劑盒的過程中應注意些什么呢？
1、PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行，設立一個的PCR實驗室。
2、純化模板所選用的方法對污染的風險有很大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結果，純化的方法越簡單越好。
3、所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4、PCR試劑配制應使用高質量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5、PCR的樣品應在冰浴上化開，并且要充分混勻。
6、試劑都應該以大體積配制，試驗一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
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