人Ⅰ型膠原膠聯(lián)N端肽(NTX)試劑盒使用說(shuō)明書(shū) 操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀 釋。 2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、 待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣 50µl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl 然后再加待測(cè)樣品 10µl(樣品終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡 量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。 3. 溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。 4. 配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用 5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。 6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl,空白孔除外。 7. 溫育:操作同 3。 8. 洗滌:操作同 5。 9. 顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色 10 分鐘. 10. 終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。 11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
注意事項(xiàng) 1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未 用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。 2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。 3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間 控制在 5 分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。 4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本 OD 值 大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的 OD 值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測(cè)定,計(jì) 算時(shí)請(qǐng)后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。 5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。 6.底物請(qǐng)避光保存。 7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn). 8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。 9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。 保存條件及有效期 1.試劑盒保存:;2-8℃。 2.有效期:6 個(gè)月 |