進口elisa檢測試劑盒所采用的方法及基本原理介紹
點擊次數(shù):627 更新時間:2020-12-18
進口elisa檢測試劑盒是一種常用的固相酶免疫測定方法,由于ELISA方法靈敏,特異性強不需要特殊設(shè)備,所以被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在臨床檢驗中除正常反應(yīng)外,有時??梢姷揭恍╁e誤結(jié)果(即假陽性或假陰性)。
溶血標本及混有紅細胞的血清采用ELISA法檢測易產(chǎn)生假陽性。可能是溶血血清中含有過氧化酶物質(zhì)(紅細胞或血紅蛋白中的亞鐵血紅素),在洗滌過程中往往難以*洗脫,它可使H2O2釋放出原生態(tài)氧,從而催化底物四甲基聯(lián)苯胺生成可溶性的有色物質(zhì),即顯藍色,產(chǎn)生假陽性,所以嚴重溶血標本禁用。
在冰箱中保存過久的標本,在間接法ELISA測定中會導致本底過深、造成假陽性;為克服上述干擾,ELISA試劑盒測定的血清標本宜為新鮮采集;如不能立即測定,5d內(nèi)測定的血清標本可存放于4℃,1周后測定的血清標本應(yīng)低溫凍存。凍存后融解的標本,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混合后再測定,但混勻時應(yīng)輕柔,不可強烈振蕩。
進口elisa檢測試劑盒的基本原理有三條:
1、抗原或抗體可通過共價鍵與酶聯(lián)接形成酶聯(lián)絡(luò)物,其而此種酶聯(lián)絡(luò)物仍能堅持其免疫學和酶學活性。
2、抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分彼此吸附,并堅持其免疫學活性。
3、酶聯(lián)絡(luò)物與相應(yīng)抗原或抗體聯(lián)絡(luò)后,可依據(jù)參與底物的顏色反應(yīng)來判定是不是有免疫反應(yīng)的存在,而且顏色反應(yīng)的深淺是與標本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的,因此,可以按底物顯色的程度顯現(xiàn)試驗效果。
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