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CFPAC-1(人胰腺癌細(xì)胞)售后:收到細(xì)胞后12天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問(wèn)題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書(shū)面質(zhì)量問(wèn)題報(bào)告并及時(shí)傳真或E-mail致銷(xiāo)售人員,我們將盡快為您解決!
更新時(shí)間:2018-10-25
CFPAC-1(人胰腺癌細(xì)胞)訂購(gòu)流程:
根據(jù)自己需要向我司說(shuō)明來(lái)意;
簽訂協(xié)議并支付貨款下單;
下單并包郵送貨上門(mén);
產(chǎn)品名稱(chēng) | CFPAC-1(人胰腺癌細(xì)胞) |
英文名稱(chēng) | CFPAC-1 (human pancreatic cancer cell) |
規(guī)格 | 5×106cells/瓶×2 |
CFPAC-1(人胰腺癌細(xì)胞)功能:
(1) 血管平滑肌細(xì)胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。
(2) 表達(dá)鈣通道及ICAM-1和VCAM-1,參與血管壁的炎癥反應(yīng)。
(3) 與血管疾病的進(jìn)展和穩(wěn)定有關(guān)。
生理變化:
(1) 主動(dòng)脈硬化。
(2) 主動(dòng)脈瘤
(3) 主動(dòng)脈鈣化。
基本特性:
(1) 組織來(lái)源于正常大鼠大動(dòng)脈組織。
(2) 鑒定:肌動(dòng)蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
(3) 原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
(4) 每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù):>5×105 cells/1ml。
(5) 肌動(dòng)蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗(yàn)證。
(6) 不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
CFPAC-1(人胰腺癌細(xì)胞)運(yùn)輸和保存:
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶(hù)協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿(mǎn)干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿(mǎn)*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開(kāi),吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長(zhǎng)至60%~70%融合時(shí),用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計(jì)算貼壁率。
1.6 生長(zhǎng)曲線(xiàn) 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn)
hFOB 1.19(SV40轉(zhuǎn)染人成骨細(xì)胞)小鼠腺高轉(zhuǎn)移細(xì)胞
HuTu-80(人十二脂腸腺)苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae胰蛋白酶-EDTA(含10mL 酶解緩沖液)
銅綠假單胞菌 Pseudomonas aeruginosa米根霉 Rhizopus oryzae
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeMLA144臂猿淋巴瘤細(xì)胞
植物桿菌 Lactobacillus plantarum溝腸桿菌 Enterobacter cloacae
大鼠小鼠雜合神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞噬夏孢歐文氏菌 Pantoea ananatis
苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti泡盛曲霉 Aspergillus awamori
廣譜彩虹預(yù)染蛋白Marker小鼠氣管和支氣管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基
溫特曲霉 Aspergillus wentii苜蓿中華根瘤菌
U-87 MG(人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞)敘利亞倉(cāng)鼠胰島β細(xì)胞
狀絲孢酵母 Trichosporon capitatum糖細(xì)黃鏈霉菌 Streptomyces microflavus
紅曲霉 Monascus ankaBNL 1ME A.7R.1(小鼠肝上皮細(xì)胞)
CFPAC-1(人胰腺癌細(xì)胞)5,000 U (20 x 250 U)FastStart Taq DNA Polymerase,
100 µg (500 µl)Anti-HA Fluorescein
50 discs (each 82 mm diameter)Nylon Membranes, 50 discs (82 mm)
1,000 U (50 U/µg)Reverse Transcriptase AMV,
1,000 U (20 µl)ExpandTM Reverse Transcriptase
1 kit (50 labeling reactions)High Prime DNA Labeling Kit
150 UAnti-Fluorescein-POD
200 U for up to 40 reactions of 50 µl final volume each containing 5 U enzyme blendExpand 20 kbPLUS PCR System(long PCR products, 20 to 35 kb)
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