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更新時間:2018-10-31
小鼠骨髓間充質干細胞(EGFP標記)訂購流程:
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產品名稱 | 小鼠骨髓間充質干細胞(EGFP標記) |
英文名稱 | Mouse bone marrow mesenchymal stem cells (EGFP mark) |
規(guī)格 | 5×105cells/瓶 |
小鼠骨髓間充質干細胞(EGFP標記)功能:
(1) 血管平滑肌細胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。
(2) 表達鈣通道及ICAM-1和VCAM-1,參與血管壁的炎癥反應。
(3) 與血管疾病的進展和穩(wěn)定有關。
生理變化:
(1) 主動脈硬化。
(2) 主動脈瘤
(3) 主動脈鈣化。
基本特性:
(1) 組織來源于正常大鼠大動脈組織。
(2) 鑒定:肌動蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
(3) 原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
(4) 每凍存管細胞數:>5×105 cells/1ml。
(5) 肌動蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗證。
(6) 不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
0.156-10 ng/mL人黑素細胞蛋白PMEL(Melanocyte protein PMEL)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mLELISA Kit for Human Melanocyte protein PMEL
15.6-1000 pg/mL人過氧化還原酶1(PRDX1)ELISA試劑盒
15.6-1000 pg/mLELISA Kit for Human Peroxiredoxin-1
0.156-10 ng/mL人過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活因子1(PPRC1)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mLELISA Kit for Human Peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator-related protein 1
3.12-200 ng/mL人Ⅱ型前膠原羧基端肽(PⅡCP)ELISA試劑盒
3.12-200 ng/mLELISA Kit for Human C-terminal propeptide of Collagen alpha-1(II) chain
小鼠骨髓間充質干細胞(EGFP標記)293FT(人胚腎細胞)5×106cells/瓶×2
NCI-H2087(人非小細胞肺腺細胞)5×106cells/瓶×2gersion
肝細胞HBV病毒株英文名稱:HEPG2.2.15
錳鹽營養(yǎng)瓊脂/Manganese(II) Nutrient Agar用于嗜熱需氧芽孢桿菌的檢驗250克國產/進口
MuM-2C(人眼脈絡黑色素瘤細胞)5×106cells/瓶×2gersion
小鼠肝細胞英文名稱:H22
緩沖蛋白胨水/緩沖蛋白胨水增菌液/BPW沙門氏菌前增菌培養(yǎng)和李氏菌前增菌培養(yǎng)250克國產/進口
Protein G Affinity MagBeads/Protein G 磁性親和純介質0.5ml國產gersion
小鼠胃粘膜上細胞*培養(yǎng)基100mL
YEB Agrobacterium Growth MediumBR100克國產/進口
STO(小鼠胚成纖維細胞)5×106cells/瓶×2
CA46(人Burkitts淋巴瘤細胞)5×106cells/瓶×2
LB瓊脂/LB Agar大腸桿菌增殖250克國產/進口
小鼠骨髓間充質干細胞(EGFP標記)運輸和保存:
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續(xù)計數10d,繪制細胞生長曲線