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小鼠腎動脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基說明書

簡要描述:

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更新時間:2018-11-09

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小鼠腎動脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基說明書

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產(chǎn)品名稱

小鼠腎動脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基說明書

英文名稱

Mice renal artery smooth muscle cell culture medium

規(guī)格 

100mL


(1)       血管平滑肌細胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。
(2)       表達鈣通道及ICAM-1和VCAM-1,參與血管壁的炎癥反應。
(3)       與血管疾病的進展和穩(wěn)定有關。
 生理變化:
(1)       主動脈硬化。
(2)       主動脈瘤
(3)       主動脈鈣化。
基本特性:
(1)       組織來源于正常大鼠大動脈組織。
(2)       鑒定:肌動蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
(3)       原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
(4)       每凍存管細胞數(shù):>5×105 cells/1ml。
(5)       肌動蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗證。
(6)       不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。


0.312-20 ng/mL人生長激素促分泌素受體(GHSR)ELISA試劑盒

0.312-20 ng/mLELISA Kit for Human Growth hormone secretagogue receptor type 1

0.156-10 ng/mL人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC-3)ELISA試劑盒

0.156-10 ng/mLELISA Kit for Human Glypican-3

15.6-1000 pg/mL人促性腺激素釋放激素(GnRH)ELISA試劑盒

15.6-1000 pg/mLELISA Kit for Human Progonadoliberin-1

15.6-1000 pg/mL人胰高血糖素樣肽1(GLP-1)ELISA試劑盒

15.6-1000 pg/mLELISA Kit for Human Glucagon-like peptide 1
小鼠腎動脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基說明書狀絲孢酵母 Trichosporon capitatum靈芝 Ganoderma lucidium

HCC38(人腺導管細胞)苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

雙孢蘑菇rCSC, 大鼠心肌細胞

異常漢遜酵母 Hansenula anomala大鼠尿道上皮細胞*培養(yǎng)基

人前列腺平滑肌細胞*培養(yǎng)基QGY-7701, 人肝細胞

金龜子綠僵菌 Metarhizium anisopliae苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

熱帶假絲酵母 Candida tropicalis地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis

斯氏假單胞菌 Pseudomonas stutzeri苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

紅冬孢酵母 Rhodosporidium toruloides蝙蝠蛾擬青霉 Paecilomyces hepialus

Daudi(人淋巴瘤細胞)涇陽鏈霉菌 Streptomyces jingyangensis

戊糖桿菌 Lactobacillus pentosusrEPC,大鼠內(nèi)皮祖細胞-骨髓

蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensisHCCLM3(人高轉移肝細胞)

香菇 Lentinula edodesAGS人胃腺細胞
小鼠腎動脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基說明書運輸和保存:
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線

 

 

 

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