試劑的組成和配制：

提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；

試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；

試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。

產(chǎn)品簡介：

產(chǎn)品名稱：結(jié)合態(tài)淀粉合成酶(GBSS)試劑盒(可見顯色法)價格

規(guī)格：48樣 96樣

貨號：AS188

檢測方法：可見分光光度法 微板法

產(chǎn)品分類：碳水化合物代謝系列

貯存溫度：2～8℃。

本試劑盒保質(zhì)期：6個月。本產(chǎn)品僅用于科研實驗。

所需的儀器和用品：

可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定，了解本批樣品情況，熟悉實驗流程，避免實驗

樣本和試劑浪費！

1、樣本制備

① 組織樣本：

取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測液。

【注】：若增加樣本量，可按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進行提取

② 細菌/細胞樣本：

先收集細菌或細胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL

提取液，超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）；

12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。

【注】：若增加樣本量，可按照細菌/細胞數(shù)量（10

4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測；若渾濁，離心后取上清檢測。

含225ml蒸餾均質(zhì)袋 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：10個/包

含250mlPreston肉湯均質(zhì)袋(雙料) 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：250ml/袋*10

MUG快速鑒定大腸試劑 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：5ml*10支/盒

MIU培養(yǎng)基 英文名稱：MIU Medium 產(chǎn)品規(guī)格：20支/包

磷酸鹽緩沖液 （PBS pH7.2） 英文名稱：Phosphate Buffered Saline 產(chǎn)品規(guī)格：9ml*20支/包

改良EC（mEC+n）肉湯 英文名稱：Modified EC Enrichment Broth 產(chǎn)品規(guī)格：10ml*20支/包

三糖鐵管 英文名稱：TSI 產(chǎn)品規(guī)格：5ml*20支/包

LST發(fā)酵管（含小倒管） 英文名稱：LST 產(chǎn)品規(guī)格：10ml*20支/包

LST-MUG 英文名稱：LST-MUG 產(chǎn)品規(guī)格：10ml*20支/包

EC肉湯（含小倒管） 英文名稱：EC Broth 產(chǎn)品規(guī)格：10ml*20支/包

結(jié)合態(tài)淀粉合成酶(GBSS)試劑盒(可見顯色法)價格體液總膽汁酸酶循環(huán)比色法定量檢測試劑盒  20次

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操作步驟:

實驗開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高時，應(yīng)對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內(nèi)配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.        每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性，底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進行檢測。